使用奥林巴斯 CKX53 显微镜观察精子形态,可按以下步骤进行:
奥林巴斯 CKX53 显微镜前期准备
1.样本采集与处理:按照前述方法采集精液样本,确保在采集后 1 小时内进行观察。若精液未完全液化,可轻轻晃动样本容器以加速液化过程。
2.调试显微镜:将奥林巴斯 CKX53 显微镜接通电源,打开光源开关,调节亮度旋钮至合适的亮度。旋转物镜转换器,将低倍物镜(如 10×)对准载物台中央的通光孔。
3.准备载玻片和盖玻片:用镊子夹取干净的载玻片和盖玻片,用擦镜纸擦拭干净,避免有灰尘或杂质影响观察。
奥林巴斯 CKX53 显微镜样本观察
1.制作涂片:用吸管吸取适量液化后的精液,滴一滴在载玻片中央。然后用镊子轻轻盖上盖玻片,注意避免产生气泡。若精液量过多,可用吸水纸吸去多余的液体。
2.低倍镜观察:将制作好的涂片放在载物台上,用压片夹固定好。通过粗准焦螺旋调节载物台高度,使物镜与涂片接近但不接触。然后从目镜中观察,同时调节粗准焦螺旋,缓慢提升载物台,直至看到清晰的精子图像。使用低倍镜先对整个涂片进行初步观察,了解精子的分布情况和大致形态,找到精子较为密集且分布均匀的区域,以便进一步观察。
3.高倍镜观察:将需要进一步观察的区域移至视野中央,旋转物镜转换器,换用高倍物镜(如 40× 或 100×)。此时,只能使用细准焦螺旋来调节焦距,以获得更清晰的精子形态图像。在高倍镜下,可以仔细观察精子的头部、颈部、尾部等结构,注意观察精子头部的形状、大小,是否有畸形,如大头、小头、尖头、双头等;颈部是否有肿胀、弯曲等异常;尾部是否完整、有无卷曲、断裂等情况。
4.记录与分析:可以使用显微镜自带的成像系统或连接相机,拍摄精子形态的照片,以便后续分析和记录。也可根据观察到的精子形态特征,按照世界卫生组织(WHO)的标准进行分类和计数,计算正常形态精子和畸形精子的比例,评估精子形态的质量。
奥林巴斯 CKX53 显微镜注意事项
1.操作过程中要保持载玻片和盖玻片的清洁,避免污染样本。
2.调节焦距时要缓慢、轻柔,避免物镜与涂片碰撞,损坏物镜或涂片。
3.在高倍镜下观察时,由于视野较小,要注意移动涂片,全面观察精子的形态,避免遗漏异常情况。
4.观察完毕后,及时关闭显微镜光源,以延长灯泡寿命。取下涂片,清洁载物台和物镜,将显微镜恢复到初始状态。